本文详细介绍了细胞冻存的步骤、冻存液成分及DMSO的等级和无菌过滤方法。包括收集细胞、加入冻存液、梯度降温等步骤,以及使用含5-10% DMSO和90-95%新鲜培养基的冻存液。强调使用Tissue culture grade级别的DMSO,并提供无菌保存和过滤建议。
本文介绍了细胞接种密度的标准,强调细胞数不足对生长的影响。解释了二价离子对trypsin活性的抑制作用及EDTA的使用方法和注意事项。提供了悬浮细胞传代的处理方法,包括稀释细胞浓度和分瓶步骤。
细胞复苏的一般步骤,包括解冻、转移与离心、重悬与培养。强调了使用与原先培养条件不同的培养基可能导致细胞无法存活,建议进行逐步适应实验。同时,提供了常规动物细胞离心处理的转速建议,避免过高转速导致细胞死亡。
本文提供血清处理与使用的常见问题及解决方案,涵盖过滤、解冻、保存、沉淀物处理和热灭活血清的使用。强调逐步解冻和正确保存的重要性,提供显微镜下“小黑点”的处理建议,帮助优化血清使用,提高实验成功率。
本文提供细胞培养中抗生素使用的指导,包括不同来源细胞株的处理方法、寄送活细胞时的抗生素添加,以及检测mycoplasma时的注意事项。还介绍了去除细菌污染的抗生素混合配方,帮助优化细胞培养条件。
本文详细介绍了血清和血浆的制备步骤,包括样本采集、静置、离心和保存方法。强调了避免溶血、正确混匀和缓慢解冻的重要性,提供了样本处理和使用的注意事项,帮助研究人员优化实验操作,提高检测结果的准确性。