Western Blot (WB) 实验全流程与产品解决方案图谱
从样本制备到结果分析的完整实验流程,搭配各环节关键试剂与一体化解决方案
第一阶段:样本制备
细胞/组织裂解与蛋白提取定量
1. 样本裂解与蛋白提取
高效裂解细胞或组织样本,释放细胞内蛋白质,同时保持蛋白质的完整性和生物活性。
2. 蛋白浓度测定
准确测定蛋白样品浓度,为后续实验提供准确的蛋白上样量。
第二阶段:凝胶电泳
蛋白分离与制胶
3. 凝胶制备
制备聚丙烯酰胺凝胶,用于蛋白质按分子量大小进行分离。
4. Marker选择与上样参考
提供精确分子量参照,用于实时监测电泳进程、判断转膜效果及准确定量目标蛋白分子量。
校准级彩色预染蛋白Marker(8-180kDa / 10-250kDa)
"让标准,更标准"
- 广谱覆盖,精准参照:分别覆盖8-180kDa和10-250kDa科研常用范围,关键分子量条带偏差<2%,准确度媲美非预染Marker
- 彩色设计,实时监控:72kDa(橙红)、8/25kDa(绿)等特征颜色,无需染色即可在电泳和转膜后实时观察进程与效果
- 卓越稳定性:经50次冻融、40℃高温及室温存放测试,性能稳定,解决运输、存放及频繁取用的顾虑
- 操作极简:预混1×上样缓冲液,无需煮沸与稀释,直接上样,提升实验效率
校准级高分子彩色预染蛋白Marker(25-400kDa)
"大分子研究的精准标尺"
- 专为大分子设计:覆盖25-400kDa超大范围,精准涵盖绝大部分科研大分子蛋白(如>200kDa蛋白)
- 高准确度与清晰度:关键大分子量条带(如250kDa,400kDa)准确迁移,上样5-10μL即可获得锐利、无拖尾的条带
- 跨体系兼容:在Tris-Glycine, Tricine, Bis-Tris等多种电泳缓冲体系中均保持稳定迁移
- 直观验证转膜:彩色条带可在转膜后直接确认大分子蛋白是否成功转移,省去丽春红染色步骤,避免抗体浪费
5. 样品准备与上样
将蛋白样品与上样缓冲液混合,变性后加入凝胶孔中进行电泳。
6. 电泳分离
在电场作用下,蛋白质按分子量大小在凝胶中迁移分离。
第三阶段:转膜
蛋白转移至膜上
7. 蛋白转膜
将凝胶中分离的蛋白质转移到膜上,便于后续的免疫检测。
第四阶段:免疫检测
封闭、抗体孵育与洗涤
8. 膜封闭
封闭膜上的非特异性结合位点,减少背景信号。
9. 抗体孵育
一抗和二抗与目标蛋白特异性结合。
10. 膜洗涤
去除未结合和非特异性结合的抗体,减少背景信号。
第五阶段:检测分析
信号检测与结果分析
11. 信号检测
通过化学发光或荧光方法检测目标蛋白信号。
12. 膜再生与重复检测
去除已结合的抗体,进行其他蛋白的检测。
第六阶段:辅助检测
总蛋白检测与染色
13. 总蛋白染色
检测总蛋白上样量,作为内参对照。
第七阶段:完整解决方案
我们提供多种时长与特性的全流程解决方案,您可根据实验的紧急程度和对灵敏度、重复性的要求进行选择。
14. 全流程试剂盒
完整的Western Blot实验一站式解决方案,满足从极速到常规的不同实验需求。