Meganucleases、TALEN、ZFN与CRISPR-Cas基因编辑技术概述
基因编辑技术的引入推动了分子生物学和生物技术的蓬勃发展,开启了后基因组时代。在过去十年间,多种核酸酶基因编辑技术相继被开发并得到广泛应用。本文着重介绍了几种备受关注的基因编辑技术的作用机制以及应用。
本公司开发的TSA 试剂盒拥有国内外最全的产品组分,包括 TSA 标记荧光素、TSA 稀释液、3% H₂O₂、封闭液、一抗稀释液、抗体洗脱剂、HRP - 山羊抗兔 / 鼠 IgG、DAPI 染液及抗荧光淬灭封片剂,为用户提供一站式实验解决方案,极大提升实验便利性。其配备的 7 色荧光底物覆盖 480–750 nm 波长范围,可按需自由搭配,实现单张切片 7 重信息的同步获取。同时配套的二抗兼容兔 / 鼠多物种一抗,打破传统种属限制,搭配针对性研发的温和抗体洗脱剂,能在去除抗体的同时保留抗原与荧光信号,循环染色 5–7 轮仍可维持组织结构完整,相较于微波热修复大幅降低样本损伤。作为通用型试剂盒,其适用范围广泛,可适配石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片、细胞涂片、类器官等多种组织样本,且依托专业的技术支持与质量保障体系,用户在使用过程中遇到的各类问题均能获得及时有效的解决方案。
酪酰胺信号放大(TSA,Tyramide Signal Amplification)技术是一类基于酶促催化反应的高灵敏度原位检测技术,其核心机制是利用辣根过氧化物酶(HRP)的高效催化活性,对样本中的靶蛋白或核酸分子进行特异性、高密度标记。作为突破传统检测技术灵敏度瓶颈的关键手段,TSA 技术通过独特的信号放大效应,能够在荧光免疫细胞化学(ICC)、免疫组化(IHC)和原位杂交(FISH)等多个核心应用场景中,显著增强靶标相关荧光信号的强度。相较于传统检测方法,该技术可有效捕捉到低丰度靶标 —— 包括样本中微量表达的功能蛋白、稀有细胞表面标志物、低拷贝核酸片段等传统手段难以检出的目标分子,为生命科学研究与临床诊断提供了更精准、更全面的检测解决方案,广泛适配石蜡切片、冷冻组织、细胞样本、类器官等多种样本类型的检测需求。
酪酰胺信号放大(TSA,Tyramide signal amplification)技术的问世,为荧光多重染色提供了高效的信号放大解决方案,有效破解了传统技术面临的诸多局限。其核心原理在于,一抗与靶点特异性结合,偶联有辣根过氧化物酶 HRP 的二抗与一抗结合后,向反应体系中引入携带荧光基团的酪胺分子。荧光标记的酪胺盐在 HRP 催化过氧化氢(H2O2)的条件下会产生共价键结合位点,进而引发大量酶促反应。这些反应产物能够与周围蛋白(如色氨酸、组氨酸、酪氨酸残基所在的蛋白)相结合,在抗原-抗体结合处堆积大量荧光素,使信号强度实现数十倍的提升,即便低丰度靶点也能被精准检测。